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84農業網 時間:2018-03-14 作者:佚名 來源:網絡整理
奧利亞羅非魚(Oreochromisaureus),系鱸形目、麗魚科、羅非魚屬,是原產于非洲的一種熱帶中小型魚類,它與尼羅羅非魚雜交的后代奧尼羅非魚(奧利亞羅非魚♂×尼羅羅非魚♀),具有高雄性率和明顯的的生長優勢,比雙親生長快20%~30%,因此多用于做生產奧尼羅非魚的親本。奧利亞羅非魚繁殖條件要求低,具有性成熟早、產卵周期短等特點,只要溫度適宜,就能在小面積靜水水體中一年多次繁殖,在生產上比較容易得到大量的苗種,因此,很少有人對其進行人工繁殖研究。隨著我國羅非魚的養殖不斷發展,對羅非魚的相關研究也不斷開展,尤其在羅非魚的育種方面,如進行雌核發育,科間雜交等,這就需要通過人工繁殖來獲得實驗材料。由于羅非魚是一年多次產卵型魚類,它的性腺發育是非同步性的,進行羅非魚人工繁殖比較困難,很難獲得成熟卵,從而影響羅非魚相關研究工作的進一步深入。經過幾年的摸索,初步掌握了奧利亞羅非魚人工繁殖技術,2005年進行了6批奧利亞羅非魚人工繁殖,現將人工繁殖試驗情況總結如下。
1材料與方法
1.1親魚來源與培育
親本為淡水漁業研究中心保存的純種奧利亞羅非魚,年齡1~3齡,體重150~750g。選擇體形完整、體質健壯的做親魚,每畝按雌雄比3∶1放養600~800尾。親魚放養前每畝施經發酵的糞肥250~500kg培養天然餌料;親魚下塘后,投喂餅粕、麩皮、配合飼料等人工餌料,日投餌量為魚體重的5%左右。另外,定期補充青菜葉、浮萍等青飼料。投飼按"四定"原則,池水保持"肥、活、嫩、爽"。
1.2產卵池和孵化設施
產卵池為1.2m×0.8m×1.0m的玻璃水簇箱,池水用曝氣3d以上的自來水。魚卵在玻璃培養缸和直徑15cm的培養皿中孵化。
1.3雌、雄魚及成熟度的判別
雌魚腹部有三個孔,即肛門、生殖孔和泌尿孔,泌尿孔在生殖突起的頂端,生殖孔開在肛門和泌尿孔之間,為"一"字形的狹長開口,與生殖突垂直。雄魚只有兩個開孔,即肛門和尿殖孔。在繁殖季節,雄魚體色鮮艷,呈深紫色或紫褐色,背鰭、胸鰭、尾鰭邊緣呈艷麗的桔紅色,雌魚體色則呈灰黃色。性成熟的雌魚在生殖季節性腺輪廓也不明顯,性腺成熟好的雌魚,順著卵巢方向稍用力擠壓,能擠出卵,且卵粒游離,飽滿有彈性。如果魚口中有卵,則是剛產過卵不久,不能用于催產;如果不能擠出卵或擠出的卵大小不均,且粘連在一起,則成熟度不夠,不適合催產;如擠出的卵粒無光澤,塌扁,用手輕碰就破裂,則過熟不適合催產。性成熟的雄魚輕擠腹部,會有透明、稍粘稠的液體從尿殖孔射出。
1.4催產與人工授精
采用一次注射法,胸鰭基部注射,劑量為雌魚4mgDOM+6μgLRH~A/kg,雄魚減半,每尾魚的注射量控制在1mL內。催產后的親魚按雌雄比1∶1放入水簇箱,每個水簇箱放5~7對親魚,增氧泵24h增氧。魚發情時,將雌、雄親魚撈起,用毛巾擦干,將雌魚卵和雄魚精液擠入小瓷盆中,用羽毛攪動1min,再加入適量的生理鹽水,靜止放置2~3min后,倒去生理鹽水,然后將受精卵進行孵化。
1.5受精卵孵化與胚胎發育觀察
將受精卵轉移到培養皿或培養缸中靜水孵化,每個培養皿放卵50~100粒,培養缸放卵200~300粒。每2h用吸管吹動魚卵1次,發現破卵、死卵立即吸除,定時換水,保持水質清新。胚胎發育觀察的材料為人工授精的受精卵,在實驗室內孵化并進行連續觀察記錄。觀察期間孵化水溫是26~28℃。
1.6魚苗培育
魚苗出膜3d后,腹腔背部出現鰾點,腸管與肛門相通,開始投喂雞蛋黃、輪蟲等或小型枝角類和橈足類,一周后投喂粉狀配合飼料。魚苗開口后7~10d在培養缸中培養,之后放入水簇箱培養,長到2~3cm時放入池塘養殖。
2結果
2.1親魚選擇、催產情況
從5月30日到8月13日,每隔15d左右做一次人工繁殖試驗,共做了6次,每次從400尾雌魚中能挑選出6~10尾成熟度好的親魚。6次共催產雌魚40尾,25尾產卵,催產率為62.5%。
2.2效應時間和產卵行為
水溫26~28℃時,效應時間為28~36h。產卵前,個體之間因占地盤不停地打斗,雄魚一般勢強,占據水簇箱的下層和水簇箱邊角處,雌魚一般勢弱,多被趕到水簇箱上層。快要產卵時,雌魚生殖孔會突出3~5mm,通常會下沉到水簇箱底部,占據一處,并有做窩行為:不時地將占據處的雜質、臟物銜開。在雌魚做窩期間,常有雄魚與之嬉咬、追逐、打轉,直到雌魚產卵,雄魚排精。卵分數次產出,每次間隔2~3min,產出的卵粒隨即吸入口中,魚卵在雌魚口腔內孵化。150g的雌魚產卵1200粒左右。
2.3受精卵孵化和胚胎發育
奧利亞羅非魚卵為沉性卵、無黏性,形如鴨梨,充滿卵黃,尖的一端為動物極。卵的其長徑為2.06~2.40mm,寬徑為1.53~1.80mm,卵徑大小隨親魚大小而有差異。受精卵吸水后膨脹,飽滿且富有彈性,卵膜透明,在解剖鏡下可清楚看到胚胎發育情況。受精卵30min左右形成胚盤,開始細胞分裂,胚胎發育經過胚盤形成期、卵裂期(2細胞期,4細胞期,8細胞期,16細胞期,多細胞期),囊胚期(高囊胚期,平囊胚期)、原腸期(原腸初期,原腸中期,原腸末期)、神經胚期(神經胚期,胚孔封閉期)、器官形成期(視泡形成期,聽泡形成期,心臟形成期)、血液循環期、和出膜期。水溫26~28℃時,受精卵孵化時間為78~90h,整個胚胎發育期積溫約需要2100℃.h。
2.4魚苗培育效果
人工條件下奧利亞羅非魚魚苗很容易培養,除畸形魚苗在出膜2~3d后死亡外,正常苗基本都能存活。
3討論與分析
由于奧利亞羅非魚性腺發育不同步,很難選出成熟度合適的雌魚。在繁殖季節,性成熟的雌魚性腺要冬成熟度不夠,要么剛剛產過卵,成熟度正好的很少,一般選中率只有1.5%~2.5%左右。因此,人工繁殖最好在奧利亞羅非魚出越冬池后第一次產卵(15d左右)時開始。因為在奧利亞羅非魚出越冬池后到第一次產卵期間,其性腺發育比較一至,選出成熟度好的親魚機率高些。另外,在繁殖旺盛期(6月初到7月底),也能選出較多的親魚。選出的親魚必須盡快催產,否則就會過熟或自產。
使用腦垂體(PC)、絨毛膜促性腺激素(HCG)、地歐酮(DOM)、魚用促排卵素(LRH-A2)做不同的組合催產奧利亞羅非魚,結果發現使用DOM和LRH-A2組合催產效果較好,但催產率也只有60%左右,因此,催產劑的組合和劑量還有待優化。奧利亞羅非魚人工催產效應時間很難把握,選出的雌親魚催產效應時間差別較大,這可能是因為其一年多次產卵,性腺發育不一至造成的。親魚成熟度好則效應時間短,成熟度差則效應時間長;個體小則效應時間短,個體大則效應時間長,不同的個體,效應時間相差8~10h。一般100g~150g雌魚催產效果較好。另外,奧利亞羅非魚發情時的行為也不是特別明顯,在人工環境下很難把它們搶占地盤的打斗和發情時的嬉咬分開,只有發現雌魚開始產卵才能認為是效應時間到了。試驗曾用水泥池做產卵池,結果很難發現奧利亞羅非魚什么時候開始發情產卵,用玻璃水簇箱做產卵池也是為了便于觀察它們的活動、產卵情況。雌魚在快要產卵時有兩個前兆,一是生殖孔會突出3~5mm,二是有做窩行為。當發現這兩個特征時,說明效應時間快到了,隨時都有可能產卵,這時要特別注意。
奧利亞羅非魚卵孵化時間較長,水溫在26~28℃時,魚卵從受精到出膜要78h以上。在孵化期間,魚卵很容易長水霉死亡。在少量魚卵孵化時,用曝氣的冷開可避免魚卵長水霉。由于奧利亞羅非魚卵的卵黃很多,幾乎充滿整個魚卵,魚卵長時間孵化容易破裂,造成卵黃外漏。尤其是在孵化到原腸期后,畸形卵和未受精卵都會破裂,正常的受精卵這時也容易破裂。當孵化水溫32℃以上時,即使發育良好的卵也會在孵化前因卵膜破裂卵黃外漏而全部死亡。魚卵破裂后漏出的卵黃還會使水質迅速惡化,從而引起其它正常魚卵缺氧死亡。在培養皿、玻璃缸中靜水孵化時,要及時把破裂的魚卵及漏出卵黃吸除,并要經常換水。
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