馬鈴薯試管苗工廠化快繁試驗研究

84農(nóng)業(yè)網(wǎng)　　 時間：2018-03-14 　　 作者：佚名 　　 來源：網(wǎng)絡(luò)整理

多年來，由于農(nóng)民的自繁自育自留種，使得馬鈴薯在生產(chǎn)過程中產(chǎn)量逐年下降，品質(zhì)變劣，商品形狀變差等，經(jīng)科學(xué)家研究證明，病毒的侵染及其在薯塊內(nèi)積累是馬鈴薯“退化”的主要原因。為了解決我市馬鈴薯主栽品種嚴(yán)重退化，產(chǎn)量降低這一問題，我所將馬鈴薯脫毒生產(chǎn)作為重點試驗課題，針對脫毒生產(chǎn)中存在的問題進行了試驗研究，從而利用了資源，降低了生產(chǎn)成本，為馬鈴薯的增產(chǎn)與增收提供了科學(xué)的理論依據(jù)，有力的加快了我市馬鈴薯脫毒薯生產(chǎn)的現(xiàn)代化進程。

1試驗概況

1.1試驗材料脫毒種苗由中國農(nóng)科院蔬菜花卉所提供。品種以我市主栽品種克新1號、克新3號為主，少量引進克新13號、壩薯9號、壩薯10號，以及觀察試驗品種費烏瑞它、大西洋等。

1.2試驗地點試驗設(shè)在市農(nóng)科所植物組培與工廠化育苗車間，內(nèi)配備有空調(diào)，可調(diào)節(jié)溫度的變化。

1.3試驗日期2004年3月購進脫毒苗，5月實驗室儀器購回后開始少批量擴轉(zhuǎn)，7月底進行大批量生產(chǎn)。

2試驗方法

該試驗生產(chǎn)的工藝流程是：培養(yǎng)基配置―裝瓶―滅菌―轉(zhuǎn)接―培養(yǎng)。

2.1培養(yǎng)基的配置馬鈴薯試管苗所需的培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的特點是無機鹽和離子的濃度高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，其營養(yǎng)的數(shù)量和比例能滿足植物細胞的營養(yǎng)和生理需要。（1）MS培養(yǎng)基配方：包括大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物、其他（瓊脂、糖、滅菌水）；（2）母液配制：為使各種配料稱取方便準(zhǔn)確，減少誤差及煩瑣，一般將各種試劑擴大100倍，稱取后配成母液，備用。每次配制培養(yǎng)基時，只需量取母液10ml/L制作培養(yǎng)基。（3）培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)：各種配料配好后，用pH試紙或pH儀測pH值，馬鈴薯試管苗所需的pH為5.8～6，再將瓊脂加熱至完全溶化即可。

2.2裝瓶將培養(yǎng)基裝入7×7×10cm的方體四旋口無色玻璃瓶，注意不要把培養(yǎng)基粘附到培養(yǎng)瓶口，一般裝培養(yǎng)基的量應(yīng)以能扶起每一莖段即可，裝好后用透氣的封口膜封口。

2.3滅菌滅菌采用高壓蒸汽滅菌鍋，溫度調(diào)控在121℃（正負誤差1℃），時間定為18～20分鐘。滅菌后緩慢放氣至常壓，或者自然冷卻，打開鍋蓋將滅好菌的培養(yǎng)瓶放在工作臺上冷卻待用。

2.4轉(zhuǎn)接在接種室的超凈工作臺上進行，轉(zhuǎn)接材料為引進的脫毒原原種，轉(zhuǎn)接工具有剪刀、鑷子、酒精燈、75%酒精等，完全按照無菌操作程序進行。轉(zhuǎn)接時首先將種苗材料截成8～10mm長，帶有1～2個腋芽的莖段，將莖段按植株原有的上下方向（一定要上下分清），垂直插于滅菌的培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基面上，注意葉基的芽眼部位不能插入培養(yǎng)基內(nèi)。每瓶可均勻插入新莖段15～25個，以20株最好，有利于瓶的空間利用和種苗生長，插好后用原封口膜封好，并標(biāo)明品種名稱、轉(zhuǎn)接日期、轉(zhuǎn)接人等，在檔案記錄本上記載好原始檔案。

2.5培養(yǎng)培養(yǎng)所需的條件是：溫度一般為20～25℃，光照用日光燈做光源，每層培養(yǎng)架在距架面上30cm處安裝40w日光燈2個，達到2000lx的光照強度，基本滿足馬鈴薯脫毒苗的生長需求。

3試驗結(jié)論與分析

3.1生長情況試驗材料在超凈工作臺轉(zhuǎn)接后，據(jù)觀察，在18～20℃、2000lx光照、密閉無菌條件時，頂芽2天后開始生長，3天開始生根，22～25天可長到5～6片葉、6～7cm高即可成株。用莖段轉(zhuǎn)接后，3天開始生長，5天開始生根，25～30天即可成株。且在18～20℃時，苗壯葉大。在25℃左右時，一般2天開始發(fā)芽，3天開始生根，20天即可成株，苗細弱，葉小。在28～30℃時，轉(zhuǎn)接后一天芽開始生根，根少，且難成苗，多畸形。莖干變粗，頂芽壞死，無葉，生須根。觀察結(jié)論：試管苗在20℃左右培養(yǎng)時成苗率高。

3.2污染情況據(jù)統(tǒng)計分析，試管苗生產(chǎn)中的前期擴轉(zhuǎn)和冬季的生產(chǎn)，污染率為4.4%～5.7%左右，而中期8～9月高溫季節(jié)，污染率提高為15%左右，且多為細菌性污染。結(jié)論是；馬鈴薯試管苗的生產(chǎn)時期需避過高溫季節(jié)。

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